一种用微波制备粒径可调纳米四氧化三铁微球的方法，属于纳米材料制备技术领域。步骤为：第一步，将铁盐溶于多元醇中，再加入无机盐和表面活性剂，以及加入助溶剂，混合后搅拌，得到制备四氧化三铁的前体液体，其中：多元醇与铁盐的质量比5~100∶1，无机盐与铁盐的质量比1~6∶1，表面活性剂与铁盐的质量比0~5∶1，助溶剂与多元醇的体积比0~1∶1；第二步，将四氧化三铁的前体液体置于微波用的玻璃管中，在微波反应器中进行微波加热反应，反应后得到黑色的磁性四氧化三铁纳米粒子。本发明简单、快速，制备的四氧化三铁纳米粒子磁性强、大小可调、分散性好，可分散于水或有机溶剂，适应于生物医学领域或机械电子领域中的应用。